使用ELISA檢測試劑盒的作用原理及注意事項

　　ELISA檢測試劑盒可實現(xiàn)多種分泌性蛋白(細(xì)胞因子、趨化因子、生長因子等)的同時檢測和定量，對于生物系統(tǒng)的綜合研究而言具有寶貴價值。不但具有更優(yōu)的效率、速度和檢測范圍。采用多重檢測能降低每個靶標(biāo)結(jié)果的成本。

　　ELISA檢測試劑盒的作用原理：

　　1. 抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，或是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性;

　　2. 抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;

　　3. 酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。

　　ELISA檢測試劑盒使用注意事項：

　　1.試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。

　　2.顯色問題： 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時候，要先查看顯色劑本身的情況。

　　3.加樣中可能遇到的問題：在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時，然后在進(jìn)行離心處理。

　　4.洗板時容易造成誤差： 因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動。

　　5.終止反應(yīng)：在加終止劑的時候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒。

　　6.讀板：讀板的時候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈。

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