ELISA試驗假陽性的原因及解決方案

　　一、假陽性常見原因

　　操作因素?

　　加樣誤差(如槍頭觸碰孔壁或產生氣泡)或洗滌不充分導致非特異性吸附?。

　　試劑污染或保存不當(如TMB顯色劑避光失效)?。

　　樣本因素?

　　溶血樣本釋放過氧化物酶活性物質，或細菌污染產生內源性HRP?。

　　高濃度類風濕因子或自身抗體干擾(如系統性紅斑狼瘡患者)?。

　　方法學因素?

　　鉤狀效應：樣本中待測物濃度過高導致信號抑制?。

　　試劑盒特異性不足(如不同廠家抗體交叉反應)?。

　　二、解決方案與優化措施

　　操作優化?

　　加樣規范?：懸垂加樣至孔底，避免氣泡或劃傷孔壁?。

　　洗滌：使用去離子水配制洗滌液，每次浸泡1-2分鐘，拍干力度均勻?。

　　試劑管理?：顯色劑現配現用，避免反復凍融?。

　　樣本處理?

　　溶血樣本離心去除血紅蛋白，或使用吸附劑去除干擾物質?。

　　高濃度樣本稀釋后復測，排除鉤狀效應?。

　　方法改進?

　　選擇高特異性試劑盒(如阻斷法優于競爭法)?。

　　增設陰性/空白對照，校正非特異性信號?。

　　復檢確認?

　　初篩陽性樣本需更換方法(如化學發光法或Western Blot)驗證?。

　　臨床樣本結合病史(如疫苗接種史、自身免疫病)綜合判斷?。

　　三、擴展工具與流程

　　質量控制工具?：使用Curve Expert 1.3優化標準曲線擬合?。

　　假陽性排除流程?：

　　重復實驗確認結果;

　　檢查試劑有效期及儲存條件;

　　樣本預處理(如離心、稀釋);

　　更換檢測方法或試劑盒復測?。

　　四、注意事項

　　老年人群或妊娠期女性假陽性率較高，需結合臨床評估?。

　　實驗室需定期校準設備，避免環境因素(如溫度波動)影響結果?。

　　注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。

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