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        熒光定量PCR 96孔板封膜操作指南
        更新時間:2025-09-22瀏覽:280次

          熒光定量PCR 96孔板封膜操作指南

          熒光定量PCR實驗中,96孔板的封膜質量直接影響熒光信號的檢測準確性。以下是本生對PCR板的關鍵步驟與注意事項的詳解:

          1. 封膜前的準備?

          選擇封板膜?:

          熒光定量PCR需使用?高透光性封板膜?(如透明自粘膜或光學熱封膜),確保熒光信號無衰減?。

          若需熱封,推薦溫度設置為100-110℃,時間3秒(避免過度加熱導致變形)?。

          清潔與防護?:

          戴手套操作,避免指紋污染膜面或孔板邊緣?。


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          2. 封膜操作步驟?

          貼膜?:

          從自封袋中取出單張封板膜,保持底襯面朝上,沿切線撕下底襯?。

          將粘性面一端對齊板子邊緣,緩慢貼合并拉平,避免褶皺或偏移?。

          壓膜?:

          手動壓膜?:用邊緣光滑的卡片(如銀行卡)水平、垂直各壓兩次,確保孔間及邊緣密封?。

          儀器壓膜?:使用熱封儀(100-110℃)或冷封儀(恒定壓力)快速密封,避免氣泡或漏液?。

          檢查密封性?:

          觀察膜與板間是否緊密貼合,無液體殘留或褶皺?。

          離心(500×g,1分鐘)去除氣泡,提升密封效果?。

          3. 常見問題與解決方案?

          封膜不嚴?:

          原因:壓力不足、溫度不當或膜質量差。

          解決:重新壓膜或更換高粘性膜?。

          熒光信號異常?:

          原因:膜透光性差或封膜后未離心。

          解決:使用光學級膜并嚴格離心?。

          4. 擴展工具推薦?

          熱封儀?:適用于快速密封,適配多種膜類型(如鋁箔膜、光學膜)?。

          離心機?:專用微孔板離心機可有效去除氣泡?。

          注意事項?:

          封膜后靜置10分鐘,增強粘合力?。

          避免反復開蓋,防止水蒸氣影響熒光檢測?。


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          注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。

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