豬白介素12(IL-12)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

　　以下是天津本生豬白介素12(IL-12)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明摘要：

　　BS-4657   豬白介素12(IL-12)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體夾心法：包被抗豬IL-12抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-12，依次加入生物素化檢測(cè)抗體和酶標(biāo)試劑，通過TMB顯色反應(yīng)測(cè)定OD值，濃度與吸光度成正比。

　　二、試劑盒組成

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：通常為4ng/瓶(2瓶)或梯度濃度(如0-2000 pg/mL)

　　酶標(biāo)板?：預(yù)包被抗體的96孔板

　　檢測(cè)抗體?：HRP標(biāo)記的抗體工作液

　　洗滌液?：20×濃縮液需稀釋使用

　　顯色液(TMB)?及終止液

　　三、操作步驟

　　樣本準(zhǔn)備?：血清/血漿需離心(3000rpm, 10分鐘)，組織勻漿需研磨離心。

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說明書梯度稀釋(如原倍標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至125-2000 pg/mL)。

　　加樣?：

　　標(biāo)準(zhǔn)孔：50μL標(biāo)準(zhǔn)品

　　樣本孔：40μL稀釋液 + 10μL樣本(最終稀釋5倍)。

　　溫育?：37℃孵育30分鐘，洗滌5次。

　　顯色?：加入TMB避光顯色15分鐘，終止后15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值。

　　四、注意事項(xiàng)

　　試劑盒需2-8℃保存，使用前平衡至室溫。

　　洗滌需，避免孔間交叉污染。

　　計(jì)算結(jié)果時(shí)需乘以稀釋倍數(shù)(如5倍)。

　　五、檢測(cè)范圍與性能

　　靈敏度?：通常<1.0 IU/mL。

　　檢測(cè)范圍?：10-240ng/L或6.25-2000 pg/mL(不同品牌有差異)。

　　完整操作請(qǐng)以具體試劑盒說明書為準(zhǔn)，以上資料僅供參考。

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