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        大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA檢測試劑盒技術說明書
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          大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA檢測試劑盒技術說明書

          BS-2924 大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒

          一、產品概述

          本試劑盒采用雙抗體夾心法,用于定量檢測大鼠血清、血漿、細胞培養上清等樣本中的白三烯B4(LTB4)水平。LTB4是花生四烯酸代謝產物,在炎癥反應和免疫調節中起關鍵作用?1。

          二、檢測原理

          ?包被抗體?:微孔板預包抗大鼠LTB4單克隆抗體?1?樣本孵育?:樣本中的LTB4與包被抗體結合

          ?酶標抗體?:加入生物素化的檢測抗體形成復合物?2?顯色反應?:加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素,TMB底物顯色?1?終止反應?:加入終止液終止反應

          ?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值呈正相關?1三、試劑盒組成

          組分規格保存條件

          預包被微孔板96孔2-8℃

          標準品(凍干)6管(1000-0pg/mL)-20℃

          樣本稀釋液15mL室溫

          生物素化抗體(100×)120μL-20℃

          酶標復合物12mL2-8℃

          TMB顯色液(A/B)各6mL2-8℃避光

          終止液12mL室溫

          20×洗滌液60mL室溫

          四、樣本處理

          ?血清/血漿樣本?:

          使用EDTA/肝素抗凝管采集

          2000-3000轉/分離心20分鐘

          避免溶血樣本,2-8℃保存≤48小時,長期保存需-20℃?2?細胞培養上清?:

          離心去除細胞碎片

          可直接檢測或適當稀釋

          五、實驗步驟

          ?試劑準備?:

          洗滌液:用蒸餾水1:20稀釋濃縮液?2標準品:用樣本稀釋液配制梯度濃度(1000-0pg/mL)

          酶標抗體工作液:按說明書比例稀釋

          ?操作流程?:

          加樣(100μL/孔) → 37℃孵育90分鐘 → 洗滌4次

          加酶標抗體(100μL/孔) → 37℃孵育60分鐘 → 洗滌4次

          加TMB顯色液(100μL/孔) → 避光顯色15-20分鐘

          加終止液(50μL/孔) → 10分鐘內測定OD值

          六、技術參數

          ?檢測范圍?:62.5-1000pg/mL

          ?靈敏度?:≤1.0pg/mL

          ?精密度?:批內CV<10%,批間CV<15%

          ?回收率?:85%-115%

          ?特異性?:與結構類似物無交叉反應

          七、注意事項

          實驗前所有試劑需平衡至室溫

          以防試劑間交叉污染,使用一次性槍頭

          顯色反應時間需嚴格控制,避免過度顯色

          酶標儀需提前預熱,建議使用雙波長(450/630nm)檢測

          本產品僅用于科研,不用于臨床診斷

          八、儲存條件

          未開封試劑盒:2-8℃保存,有效期6個月

          開封后組分:按說明書要求分別保存

          注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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